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Starvio siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)指南--換液問題

轉(zhuǎn)染后需不需要換液這個問題要根據(jù)每個小核酸轉(zhuǎn)染試劑的要求來,市面上大部分的轉(zhuǎn)染試劑都會建議在轉(zhuǎn)染4-6h后進(jìn)行換液。那為什么會有轉(zhuǎn)染后的換液需要呢?主要有以下兩種原因:

第一種,有的轉(zhuǎn)染試劑在開始轉(zhuǎn)染前即鋪板時就要求使用不含血清的培養(yǎng)基,因?yàn)檠鍟D(zhuǎn)染效果有影響,但是細(xì)胞的生長需要血清提供營養(yǎng),在無血清的環(huán)境下只能存活幾個小時,所以轉(zhuǎn)染后必須更換完全培養(yǎng)基以維持細(xì)胞正常生長。

第二種,轉(zhuǎn)染試劑本身毒性比較大,轉(zhuǎn)染后如果不將培養(yǎng)基換掉,可能會對細(xì)胞造成嚴(yán)重死亡,因此會要求轉(zhuǎn)染4-6小時后進(jìn)行換液。

但是,對于毒性很低的Starvio siRNA轉(zhuǎn)染試劑來說,是不需要換液的,并且血清對轉(zhuǎn)染效果沒有影響,這點(diǎn)是很多轉(zhuǎn)染試劑所不具備的。如果大家是初次實(shí)驗(yàn),那么你做實(shí)驗(yàn)的時候一定要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書上針對是否需要換液的要求來,而不是自己去決定要不要換液以及什么時候換液。我們所參考的產(chǎn)品說明書,其實(shí)都是通過研發(fā)人員進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)得出來的一個最優(yōu)解。我們首先應(yīng)該相信這些最優(yōu)解,按照操作步驟去做,才能保證最大程度的發(fā)揮出試劑的性能。

另外,也要提醒一下大家,有些同學(xué)也許之前使用過好幾種品牌的轉(zhuǎn)染試劑,或者想用不同品牌的轉(zhuǎn)染試劑一起做平行對比實(shí)驗(yàn),很可能在這個過程中會混淆各個產(chǎn)品的操作流程及注意事項(xiàng),比如對不需要換液的產(chǎn)品在操作中進(jìn)行了換液處理,以至于出現(xiàn)轉(zhuǎn)染效果不佳的情況,這是一個及其容易被忽略但又是十分重要的問題,希望大家引起重視,嚴(yán)格根據(jù)各個說明書要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

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